Hogyan lehet elkerülni a gyakori félreértéseket az alacsony kötődő pipetta tippek használatában?

Alacsony kötő pipetta tippek A hidrofób belső felület kialakítása miatt jelentősen csökkentheti a mintamaradványokat, és különösen alkalmasak drága reagensek, viszkózus folyadékok vagy nyomminták kezelésére (például fehérjék és nukleinsavak). Ha azonban nem működnek megfelelően, akkor továbbra is befolyásolhatják a kísérlet pontosságát és megismételhetőségét. Az alábbiakban a laboratóriumi működési előírásokkal kombinált általános hibák és megoldások elemzése:

Félreértés 1: A tipp előzetes öblítésének figyelmen kívül hagyása

Rossz művelet: Közvetlenül a mintát szívja meg, és hagyja ki az előszíni lépést.

Hatás: Noha az alacsony kötődő pipetta-hegyek csökkenthetik a maradékokat, olyan minták esetén, mint a szérum, a fehérje vagy a szerves oldószerek, belső falaik továbbra is mikrok-folyadékfilmet képezhetnek a felületi feszültség miatt, ami alacsony kezdeti pipettázási térfogatot eredményez.

Helyes megközelítés: A hivatalos pipettázás előtt ismételje meg az aspiráció-ürítést 2-3-szor ugyanazzal a mintával, hogy stabil folyékony filmréteget képezzen a hegy belső falán (a magas hőmérsékletű/alacsony hőmérsékletű folyadékok kivételével).

Félreértés 2: Az aspirációs sebesség túl gyors, vagy a szög meg van döntve

Rossz művelet: A folyadék gyorsan aspirálását, vagy a pipettát több mint 20 ° -nál dönt.
Hatás:

Túl gyors pipetta: buborékok vagy hátsó szívás (folyadék rohan be a pipettába, és szennyezi a dugattyút);
A pipetta megdöntve: megváltoztatja a folyékony felületi nyomást, ami pontatlan pipettézési térfogatot és megnövekedett maradék térfogatot eredményez. Helyes megközelítés:
Pipetta lassan és lassan engedje fel: működjön állandó sebességgel, és vezérelje a dugattyú felszabadulási sebességét;
Tartsa függőlegesen: Tartsa ≤20 ° dőlési szöget, amikor a pipetta hegyét a folyékony felületbe merítik.
Félreértés 3: A viszkózus folyadékok működési különbségeinek figyelmen kívül hagyása
Rossz művelet: Használjon ugyanazt a pipettázási sebességet, mint a szokásos folyadékok a nagy járulékos mintákhoz (például glicerin és sejtszuszpenziók).
Hatás: A viszkózus folyadékok lassan folynak a pipetta hegyének belső falán, és a gyors kisülés jelentősen megnöveli a maradék térfogatát, ellensúlyozva az alacsony adszorpciós kialakítás előnyeit.
Helyes megközelítés:

Hosszabbítsa meg az elmerülési időt: maradjon a folyékony felületen 1 másodpercig, miután az aszpirált, mielőtt eltávolítja, és szüneteltesse 1 másodpercig, mielőtt megnyomja a második sebességfokozatot, hogy a folyadékot kiürítse;
Válasszon egy széles szájú pipetta tippet: A makromolekulákhoz vagy a sejtmintákhoz használjon széles szájú, alacsony adszorpciós pipettát (70% -kal nagyobb, mint a standard rekesznél) a nyíróerő csökkentése érdekében.
4. tévhit: Kemény ütés a tipp telepítésekor
Rossz mûvelet: A pipetta fogantyújának ismételt megütése a hegy "meghúzására".
Hatás: A hosszú távú ütés a pipetta tömítő alkatrészeket visel, megsemmisíti a léghajót, és szivárgást vagy térfogat hibát okoz.
Helyes módszer: Helyezze be a pipettát függőlegesen a hegybe, enyhén nyomja meg, és kissé forogjon balra és jobbra, hogy illeszkedjen.

5. tévhit: Helytelen tárolás vagy újrafelhasználás
Rossz művelet:

Helyezze a pipettát laposan, amikor maradék folyadék van a hegybe;
Az eldobható alacsony adszorpciós tippek újra felhasználása a költségek megtakarítása érdekében. Hatás:
A lapos elhelyezése miatt a folyadék visszaáramlása korrodálja a dugattyúrugót;
Az újrafelhasználás befolyásolhatja a keresztszennyezés vagy a szerkezeti deformáció miatti pontosságot. Helyes módszer:
A pipettázás után azonnal dobja el a csúcsot, és függőlegesen tegye le a pipettát;
Az újrafelhasználás szigorúan tilos, különösen olyan érzékeny kísérletek esetén, mint a PCR és az izotópok.
Szakmai tanácsadás: Maximalizálja az alacsony retenciális tippek előnyeit
Illessze a folyadékok tulajdonságait:
Illáló folyadékok (például kloroform): Kerülje el a szokásos alacsony retenciós tippek használatát, és használjon oldószer-biztonságos tippeket vagy külső dugattyú-pipettákat, amelyeket az illékony reagensekhez terveztek.
Kalibrációs ellenőrzés:
Rendszeresen mérje meg az analitikai mérleggel (1 ml = 0,9982 g 20 ℃) ​​a tiszta víz súlyát, hogy ellenőrizze, hogy a tényleges térfogat megfelel -e a szabványnak.
Kulcsfontosságú pontok összefoglalása: Az alacsony retenciós tippek javítják a pontosságot a minta elvesztésének csökkentésével, de ha a művelet részleteit figyelmen kívül hagyják, akkor továbbra is ellentmondásos lehet. A szabványosított telepítés, a sebességszabályozás, a minta jellemzőihez való alkalmazkodás és a szigorú egyszeri felhasználás képezi a nagy megismétlési kísérletek elérésének alapját.