Az alacsony kötési pipetta tippek megértése

1. Mik az alacsony kötő pipetta tippek?

Alacsony kötő pipetta tippek olyan laboratóriumi fogyóeszközök, amelyeket pipettorokhoz (pipetták) terveztek, amelyek speciális felületi kezeléseket tartalmaznak és/vagy speciális anyagokból készülnek. Alapvető tervezési céljuk az, hogy jelentősen csökkentse a minta adszorpcióját és visszatartását a hegy belső falán .

• Alapvető probléma: A stésard polipropilén-hegyek olyan felületekkel rendelkeznek, amelyekben velejáró hidrofób és töltésűek vannak, amelyek bizonyos minta komponensek, különösen a biomolekulák (például fehérjék, nukleinsavak) és viszkózus oldatok nem-specifikus adszorpciójához vezethetnek.
• Megoldás: Az alacsony kötési tippek fizikai vagy kémiai módszerekkel megváltoztatják a belső fal felületi tulajdonságait, így hidrofil és inertébbé teszik, ezáltal csökkentve a molekulák és a hegyfal közötti kölcsönhatási erőket.

2. Hogyan működnek (felszíni kezelési technológiák)

Az alacsony kötési hatást elsősorban a következő technológiák révén érik el:

• Különleges polimer adalékanyagok: A specifikus polimer-adalékanyagok (például hidrofil módosítók) beépítése a polipropilén alapanyagba a termelés során, így a hegy testének rejlő alacsony kötő tulajdonságai. Ez a jelenlegi mainstream és legstabilabb módszer.
• Felszíni bevonatok:
  • Hidrofil bevonatok: Hidrofil bevonat (például bizonyos polimer bevonatok) alkalmazása a belső falra a felületi nedvesíthetőség növelése, a folyadék visszatartása és a fehérje adszorpciójának csökkentése érdekében.
  • Inert bevonatok: Nagyon inert bevonatok (például bizonyos szilánszármazékok) alkalmazása a felszíni aktív helyek csökkentése és a kémiai adszorpció minimalizálása érdekében.
• Különleges felszíni kezelések: A polipropilén felületének mikroszerkezetének és kémiai tulajdonságainak megváltoztatása fizikai módszerekkel (például plazmakezelés) vagy kémiai maratás révén a hidrofilitás növelése érdekében.
• Rendkívül magas tisztaságú polipropilén: A rendkívül alacsony szennyezősági tartalommal rendelkező polipropilén nyersanyag felhasználása a szennyeződések által okozott potenciális adszorpciós helyek csökkentésére.

3. A legfontosabb előnyök és jellemzők

• Minimalizálja a minta elvesztését: Ez az alapvető előny. Jelentősen csökkenti az értékes, alacsony koncentrációs vagy percminták (például fehérjék, DNS, RNS, enzimek, antitestek, sejtszuszpenziók, viszkózus reagensek) adszorpcióját és visszatartását, biztosítva a pipettázást, biztosítva a pipettázást pontosság és gyógyulás .
• Javítja a kísérleti pontosságot és a reprodukálhatóságot: A csökkentett adszorpció következetesebb adagolási térfogatokat jelent, a minta átvitele által okozott kísérleti hibákat és az eredmény fokozását jelenti megbízhatóság and reprodukálhatóság .
• Csökkenti a keresztszennyeződés kockázatát: A teljesebb folyadékkibocsátás és a kevesebb mintamaradvány csökkenti a keresztszennyeződés kockázatát, amikor a különböző mintákat egymás után pipettázza.
• Ideális érzékeny alkalmazásokhoz: Minimalizálja a minta aktivitására gyakorolt ​​hatást, és különösen alkalmassá teszi őket adszorpció-érzékeny kísérletekhez a molekuláris biológiában, a sejtbiológiában, a proteomikában, a diagnosztikában stb.
• Javítja a nedvesíthetőséget: Általában jobb hidrofilitást mutat, lehetővé téve a folyadék simább áramlását a csúcson belül, csökkentve a meniszkusz tapadását és a buborékképződést, ami simább pipettázáshoz vezet.

4. Kulcsfontosságú alkalmazások (mely kísérletekre van szükségük?)

Az alacsony kötési tippek nagyon ajánlottak, szinte nélkülözhetetlenek a következő alkalmazásokhoz:

• Molekuláris biológia:
  • Nagy teljesítményű PCR, QPCR, DDPCR: Csökkenti a DNS/sablonveszteséget, biztosítva az amplifikációs hatékonyságot és a számszerűsítési pontosságot.
  • Nukleinsav tisztítás és könyvtár előkészítése: A tisztítás során megakadályozza az értékes DNS/RNS fragmensek elvesztését.
  • NGS minta előkészítése: A perc könyvtárak pontos pipettázása kritikus jelentőségű.
• Fehérjekutatás:
  • Fehérjekoncentráció -vizsgálatok (BCA, Bradford stb.): Megakadályozza a fehérje adszorpcióját, ami a koncentráció alulbecslését eredményezi.
  • Enzim aktivitási vizsgálatok/kinetika: Biztosítja a pontos enzim mennyiségét és elkerüli az aktivitás veszteségét.
  • Western blot minta előkészítése: A fehérjék pontos pipettázása az SDS -t vagy a redukáló szereket tartalmazó pufferekben.
  • Fehérje tisztítása (például affinitás kromatográfiás frakció gyűjtése): Kerülje a célfehérje elvesztését.
• Sejttenyészet és kapcsolódó kísérletek:
  • Drágasejtvonalak vagy primer sejtek passzázása/bevonása: Csökkenti a sejtek adhéziós veszteségét a csúcson belül.
  • Sejt életképességi vizsgálatok: A sejtszuszpenziók és reagensek pontos pipettázása.
  • Transzfekció: A DNS, az RNS, a transzfekciós reagens komplexek pontos pipettázása.
• Diagnosztika és klinikai tesztelés: ELISA, kemilumineszcens immunoassays, POCT: Biztosítja a pontos mintát és a reagensek mennyiségét, javítja a detektálási érzékenységet és a pontosságot.
• Viscous vagy habra hajlamos megoldások: Glicerin, DMSO, felületaktív oldatok, bizonyos pufferek: csökkenti a visszatartást és az átvitelt, javítva a pipettázás pontosságát.
• Bármely olyan kísérlet, amelyben értékes, perces mintákat tartalmaz, vagy nagy pontosságot és reprodukálhatóságot igényel.

5. Hogyan válasszuk ki a megfelelő alacsony kötőpipett tippet?

• Kompatibilitás: Az elsődleges követelmény az, hogy ők kell Legyen tökéletesen kompatibilis a pipett márkájával és modelljével. A vásárlás előtt mindig ellenőrizze a kompatibilitási listákat, vagy keresse fel a gyártó útmutatóját.
• Tanúsítások és minőség:
  • Tanúsított RNáz/DNASE/Pyrogen-mentes: Alapvető fontosságú a molekuláris biológia és a sejttenyésztési kísérletek szempontjából. Biztosítson megbízható tanúsítást.
  • Tanúsított PCR-gátló-mentes: Nagyon fontos a PCR/QPCR alkalmazásokhoz.
  • A gyártás minősége: A kiváló minőségű gyártás biztosítja a pontos dimenziókat, a következetes alakot, a burrok hiányát és a részecskék szennyeződésének hiányát (tisztasági fok). Válasszon jó hírű márkákat.
• Alacsony kötési teljesítményszint: A teljesítmény márkák és sorozatok között változhat. Figyeljen a gyártó által biztosított teljesítményadatokra (például a protein adszorpciós maradék tesztjelentések). A rendkívül igényes alkalmazásokhoz (például egysejtű szekvenálás, ultra alacsony bőség-detektálás) szükséges, a legmagasabb szintű alacsony kötési tippekre lehet szükség.
• Csomagolás és sterilitás:
  • Csomagolási formátum: Racsos (rakott vagy ömlesztett), zsákolt, szűrt (opcionális). Válassza ki a munkafolyamathoz és az automatizálási igényekhez megfelelő csomagolást.
  • Szűrt tippek: Ha a pipettatengely aeroszolszennyeződésének megakadályozására van szükség, válassza az alacsony kötési tippeket szűrőkkel (alacsony kötő szűrő tippek). Maga a szűrőnek is alacsony kötésnek kell lennie.
  • Előre szterilizált: A legtöbb kísérlet előzetes sterilizált tippeket igényel (általában gamma besugárzva). Ellenőrizze a sterilizációs módszert és a sterilitásbiztosítási szintet (SAL). A nem steril tippek alkalmasak bizonyos nem kritikus alkalmazásokra, vagy ha a laboratórium elvégzi a saját sterilizálását.
• Költséghatékonyság: Az alacsony kötési tippek általában drágábbak, mint a szokásos tippek. Értékelje a költséghatékonyságot, miközben megfelel a teljesítmény követelményeinek. Ne veszélyeztetje a kritikus kísérleteket a költségek megtakarítására szolgáló standard tippek felhasználásával, mivel a pontatlan adatok vagy a mintavesztés nagyobb hulladékhoz vezethet.

6. Használati jegyzetek

• Megfelelő melléklet: Győződjön meg arról, hogy a csúcs biztonságosan és szorosan rögzítve van a pipettához, hiányosság nélkül, hogy megakadályozzák a légszivárgást és a pontatlan mennyiségeket.
• A nedvesítés előtti: Viszkózus vagy illékony folyadékok esetén a nedvesedés (a folyadékot néhányszor a tényleges átadás előtt a folyadékot a folyadék kiszivárgása és adagolása) néha tovább javíthatja (még alacsony kötési tippekkel is). Kövesse a Pipette működési irányelveit.
• Kerülje az érintő tippek végeit: Fenntartja a sterilitást és megakadályozza a szennyeződést.
• Tárolás: Tároljon hűvös, száraz helyen a közvetlen napfénytől és a portól. Vegye figyelembe a csomagolás lejárati dátumát.